MariaR, Forse fai ancora un po' di confusione. La matrice di sostituzione SOLITAMENTE non la fai tu (a meno che non segui quello che ha detto dallolio), ma sono degli standard:
http://www.dia.unisa.it/~ads/BIOINFORMATICA/BLAST/matrici_sostituzione.html
Poi prendi le sequenze da allineare:
HEAGAWGHEE
P
A
W
H
E
A
E
e a seconda del valore che trovi nella matrice di sostituzione, li inserisci all'incrocio degli amminoacidi...
HEAGAWGHEE
P0345...
A
W
H
E
A
E
(io qui li ho inventati...)