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pippi1979
Nuovo Arrivato
5 Messaggi |
 Inserito il - 02 ottobre 2008 : 13:18:44
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Ciao a tutti, forse sto per farvi una domanda stupida...E' possibile conoscere la sequenza di un prodotto di pcr di cui non dispongo di nessuna informazione (es. senquenze dei primers, lunghezza, etc.)??
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morgan79
Utente Junior
Prov.: Bari
143 Messaggi |
Inserito il - 02 ottobre 2008 : 13:56:15
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| certo, ma se hai amplificato conoscerai almeno la sequenza dei primer, allora disegna dei primer che hanno al 5' siti per enzimi di restrizione, clona in un vettore, fai la miniprep e sequenzia con primer specifici del vettore. se la sequenza é abbastanza corta il for e rev del vettore dovrebbero coprire, altrimenti primer walking |
il sapere non è sufficiente, bisogna applicare; il volere non è sufficiente, bisogna fare |
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Neuroscience
Utente
659 Messaggi |
Inserito il - 02 ottobre 2008 : 20:15:48
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potresti clonare la banda in un vettore tipo TOPO cloning TA, poi farlo sequenziare con i primers universali
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pippi1979
Nuovo Arrivato
5 Messaggi |
Inserito il - 03 ottobre 2008 : 17:25:24
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Grazie mille!  |
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Sequenze
Didattica
