ciao ragazzi, sono mary mi sono appena iscritta al forum, volevo chiedere se qualcuno di voi aveva qualche protollo per valutare le proteine fosforilate al citofluorimetro, dato che in passato ho avuto problemi per valutarle.tutti utilizzano il western ma anche nel western riesco a valutare la forma non fosforilata ma quella fosforilata non esce-sono disperata potete aiutarmi
Non basta che tu abbia un buon Ab contro la forma fosforilata della proteina? Non c'è un protocollo particolare per le proteine fosforilate, dovrai far la marcatura normale o al max permeabilizzare la membrana se la proteina è intracitoplasmatica..
Doctors are men who prescribe medicines of which they know little, to cure diseases of which they know less, in human beings of whom they know nothing (Voltaire)
ho già provato diversi anticorpi, già uso il protocollo di permeabilizzazione. questa proteina mi sta facendo impazzire. dimenticavo.......non ho specificato il tipo di proteina: p-AKT. grazie lo stesso fra.