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tiz83
Nuovo Arrivato
Città: smallville
72 Messaggi |
 Inserito il - 26 novembre 2008 : 22:07:57
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Salve devo preparare una soluzione di NaCl 100mM finale...come faccio?
mi devo preparare una sol. iniziale di 1 Molare?e in cosa si scioglie (Acqua?)
grazie
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
 Inserito il - 26 novembre 2008 : 22:15:22
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Non è necessario preparare la soluzione 1M, ma se vuoi puoi farlo e poi diluirla 1:10.
Altrimenti calcoli quanti g di NaCl ci vogliono per fare una soluzione 100mM (indizio: sono 1/10 di quelli necessari a fare una soluzione 1M...)
Citazione:
in cosa si scioglie (Acqua?)
In cosa cuoci la pasta?  |
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tiz83
Nuovo Arrivato
Città: smallville
72 Messaggi |
Inserito il - 26 novembre 2008 : 22:20:30
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allora il mio problema è questo:
devo fare una codigestione di una dna con BamH1 e EcoRI..questi enzimi hanno concentrazioni di sali diverse.Il primo 150 mM e il secondo 50mM. Ora dopo aver digerito col 1 enzima, devo aggiungere ala mia MIX (che mi preparo per 20 microlitri) un pò di NaCl e poi l'enzima..quindi poichè già ho 50 mM ne devo aggiungere solo 100mM... il sale però lo devo agiungere alla mix da 20 microlitri e vorrei preparami una soluzione che mi permetta di pipettarlo...:-(
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 26 novembre 2008 : 22:32:53
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Attenzione, perchè aggiungendo la seconda aliquota di NaCl andresti a cambiare il volume finale e quindi la concentrazione!
Ma, comunque sia, gli enzimi non ce li hai col buffer già bello e pronto? |
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tiz83
Nuovo Arrivato
Città: smallville
72 Messaggi |
Inserito il - 26 novembre 2008 : 22:44:44
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sì i buffer ci sono...ma la mia prof dice che NaCl è diverso e lo devo aggiungere....facendo un pò i calcoli mi preparerei 1M facendo: g X PM, ovvero in 50 ml di acqua, peseri 2,9 g di sale visto che il PM è 58.44
Ora se ho già 50mM, e la voglio a 150mM, ne devo aggiungere solo 100mM. Quindi poichè 100mM finale è 0,1 M, avrò che 1M/0,1M è 10x che è il mio fd.
Ma in 20 microlitri come faccio a mettere 0,002 microlitri di sale?
help me!!! |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 26 novembre 2008 : 22:58:05
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Ok se non hai un buffer che vada bene per tutti e due devi aggiustare la concentrazione di sali per la seconda digestione!
Ma devi cercare di farlo utilizzando il minor volume possibile da aggiungere, altrimenti ti sballano anche gli altri sali!
Citazione:
Messaggio inserito da tiz83
Quindi poichè 100mM finale è 0,1 M, avrò che 1M/0,1M è 10x che è il mio fd.
Ma in 20 microlitri come faccio a mettere 0,002 microlitri di sale?
help me!!!
Però la matematica non è un opinione!!!
Quanto fa 20/10??? 
Io farei in modo ad es. di prendere un microlitro di soluzione concentrata, quindi tieni conto che la cf sarà 100mM, il volume finale 21ul (20 + 1 che aggiungi), il volume iniziale 1ul e ti calcoli a che concentrazione fare la soluzione concentrata, usando la solita formula
Ci x Vi = Cf x Vf |
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tiz83
Nuovo Arrivato
Città: smallville
72 Messaggi |
Inserito il - 28 novembre 2008 : 21:10:04
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ho risolto....ho preparato una soluzione iniziale di 5 M, in modo che il fattore di diluizione è 50X, così ho aggiunto solo 0,4 microlitri....e la digestione è avvenuta.....
Grazie a tutti del sostegno.....
siete fantastici!!!! |
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NaCl 1M
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