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Klo
Nuovo Arrivato
Prov.: Roma
107 Messaggi |
 Inserito il - 12 dicembre 2008 : 14:53:08
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Salve ragazzi, ho bisogno di una mano, sto uscendo pazza.
Allora:
Sto studiando l'attività di un enzima: GST P1-1, ieri ho misurato l'attività di questo enzima complessato con l'EGFP.
L'assorbimento del complesso è:
A280 EGFP-GST P1-1= 0,9242
Da qui ho ricavato la concentrazione con la formula di Lambert-Beer:
c = A/e*L
e= coefficente di estinzione molare= 0,94
L= cammino ottico = 1 cm
[EGFP-GST P1-1]= 0,98 mg/ml
A questo punto ho calcolato l'attività dell'enzima al minuto per diverse quantità di enzima (1ug,5ug,10ug)
E' qui che mi serve l'aiuto:
Per ottenere 1ug di enzima da una concentrazione di 0,98mg/ml quanti ul di proteina devo prelevare dalla eppendorf?
Il mio ragionamento:
0.98 mg/ml = 0.98 ug/ul = 1ug/ul
per avere 1ug di proteina devo prelevare 1 ul
Giusto?
Ora l'attività la devo misurare nella cuvetta che ha un volume:
Vcuvetta= 1ml = 1000ul
A questo punto avendo messo 1ul in 1000ul il fattore di diluizione:
F.D.= 1000ul/1ul =1000
E' corretto?
Grazie mille
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Diluizioni e concentrazioni
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