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Autore

Discussione

cristina
Nuovo Arrivato

Prov.: Trapani

47 Messaggi

Inserito il - 06 febbraio 2006 : 18:36:24

Salve a tutti!

qualcuno sa parlarmi di aflp, nello specifico a cosa serve esattamente fare la pre-amplificazione?
bye.

cris

cristiano
Nuovo Arrivato

Prov.: Novara
Citt�: novara

37 Messaggi

Inserito il - 07 febbraio 2006 : 14:45:18

L'AFLP � una tecnica per amplificare dna genomico, ottenendo come risultato un fingerprinting, ovvero una serie di sequenze amplificate di lunghezza variabile. Dopo aver tagliato con opportuni enzimi di restrizione il dna, si legano degli adattatori alle estremit� dei frammenti. A questo punto si fa una pcr pre-selettiva utilizzando dei primer che riconoscono gli adattatori e terminano con una base addizionale in 3': in questo modo vengono amplificate solo quelle sequenze che contengono in 5' la base complementare all'addizionale (ad esempio se il primer finisce con T si amplificheranno quelle sequenze che dopo l'adattatore cominciano con A) preselezionando in questo modo 1/4 delle sequenze di genomico ottenute dopo la restrizione. Per maggiori dettagli guarda il sito http://ravel.zoology.wisc.edu/sgaap/AFLP_html/fAFLP_Introduction.htm

CRI