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gianlu1000
Nuovo Arrivato

Prov.: Messina

26 Messaggi

Inserito il - 06 febbraio 2006 : 18:42:27

Ho ancora bisogno di voi..cm si fa una mappa di restrizione?

veronica
Nuovo Arrivato

42 Messaggi

Inserito il - 08 febbraio 2006 : 17:15:27

é un tipo di mappa fisica e ti permette di visualizzare i siti di taglio delle endonucleasi di restrizione nel dna.
Allora, parti dalla tua molecola di dna che contiene per esempio siti di riconoscimento per BamH1 e siti per Ecor1. Fai una prima digestione con bamh1 e misuri le dimensioni dei frammenti con "elettroforesi su gel di agarosio"; con la stessa molecola fai la seconda digestione con ecor1 e misuri i frammenti allo stesso modo.Ora tu puoi già dire per ogni enzima quanti siti ci sono sul dna dal confronto dei frammenti. Poi fai una doppia digestione dellamolecoladi dna, cioè con tutti e due gli enzimi contemporaneamente, e l'analisi dei frammenti ottenuti con elettroforesi ti permetterà di mappare le posizioni dei siti. ovviamente potrai avere dei casi specifici in cui ci sono 2 possibilità alternative di mappa.....a questo punto dovrai fare una digestione parziale che ti darà prodotti "parzialmente" tagliati.
La tecnica è come puoi dedurre utile solo per piccole molecole di dna, altrimenti la quantità di dati e frammenti diventa difficile da maneggiare e analizzare.
spero di averti aiutato in qualche modo.
ciao