| Autore |
Discussione |
|
|
roselady
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: napoli
119 Messaggi |
 Inserito il - 16 gennaio 2009 : 23:39:25
|
ciao ragazzi,spero che mi rispondiate dopo aver postato questa discussione..
Mi sto preparando in biochimica,in particolare su tecniche di laboratorio.
Mi trovo di fronte alla tabella di purificazione delle proteine da compilare,ma ho una difficoltà nello specifico..in pratica non riesco a capire quale sia il numero delle proteine totali...sulle dispense non c'è scritto...come faccio a saperlo? di solito la concentrazione delle proteine totali risulta dal metodo di Bradford o anche detto Coomassie...per caso devo guardare nei dati del cromatogramma?( devo vedere il numero delle proteine del pool?) .Se qualcuno è bravo in queste cose ,per favore,mi aiuti...magari mi si può spiegare i concetti principali per riuscire a compilare questa tabella..su internet non ci sono i procedimenti e nemmeno sui miei libri...
Nel frattempo mi sto sconfortando in una maniera incredibile perchè martedi ho l'esame e non posso andarci senza questa tabella...ho bisogno di voi!grazie...Roselady
|
|
|
|
|
Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 17 gennaio 2009 : 11:24:24
|
Aspetta, io una cosa del genere non l'ho mai fatta ma cerco di aiutarti...Tu vuoi risalire al numero delle proteine totali diciamo in un lisato? Ammesso che riesci a risalire alla concentrazione, come vorresti passare al numero? Dalla concentrazione potresti passare alle moli, ma poi non hai un peso molecolare univoco per le proteine, come passeresti al numero di molecole? C'è forse qualche tecnica che mi sfugge...Oppure ci sta un peso molecolare medio adottato... |
 
 |
 |
|
|
paolo865
Utente Junior
Prov.: Como
Città: Olgiate Comasco
262 Messaggi |
Inserito il - 17 gennaio 2009 : 11:36:41
|
| assorbanza a 280 nm oppure bradford e assorbanza a 540 nm se non sbaglio |
|
|
|
Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 17 gennaio 2009 : 12:35:16
|
| Si ma col metodo di Bradford risali una concentrazione delle proteine totali e mi sembra si legga a 565nm... |
|
|
|
|
Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 17 gennaio 2009 : 13:07:18
|
| 595 :) |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
|
|
|
|
roselady
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: napoli
119 Messaggi |
Inserito il - 19 gennaio 2009 : 14:29:01
|
| si infatti io ho fatto il metodo di bradford. e ho ottenuto il cromatogramma.ora voglio sapere kome si fa a risalire alla concentrazione delle proteine totali per completare la tabella di purificazione. so ke devo vedere sul cromatogramma ma non so kome fare ,è quello il problema....c'è qualcuno ke mi aiuta? grazie a tutti per essere stati disponibili :) |
|
|
|
roselady
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: napoli
119 Messaggi |
Inserito il - 19 gennaio 2009 : 14:30:51
|
| p.s. sul cromatogramma si legge che il carico è pari a 10.41 microgrammi/microlitri...e questa è la concentrazione,però secondo me devo moltiplicare per qualcosa...perchè su altre tabelle già compilate c'è scritto ke le concentrazioni totali di solito sono pari a 1000 ... |
|
|
|
roselady
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: napoli
119 Messaggi |
Inserito il - 20 gennaio 2009 : 16:17:24
|
| ragazzi grazie x avermi aiutato,alla fine dovevo moltiplicare la concentrazione delle proteine totali per i l fattore di diluizione :) |
|
|
| |
Discussione |
|
tabella di purificazione proteine-biochimica
Didattica
