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 goat serum o BSA?????
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miky76
Utente Junior



126 Messaggi

Inserito il - 28 gennaio 2009 : 14:23:46  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di miky76 Invia a miky76 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
salve

sto facendo immunofluerescence e credo il mio anticorpo funziona male
per intenderci tutto e' rosso!!!

qualcuno sa quando si usa il goat serium e quando invece il BSA per il bloccaggio?

io uso BSA ma ora sto vedendo che i protocolli che usano questo anticorpo usano goat serium

forse il problema e' questo.... sbaglio il bloccaggio

help

ho gia' provato tutte le diluizioni possibili e ho giocato con il tempo del primo e secondo anticorpo

ma nulla.... il rumore di fondo sta sempre la

grazie

chick80
Moderatore

DNA

Cittā: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 28 gennaio 2009 : 14:29:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
In effetti l'alto background puo' dipendere dal bloccaggio.
Se altri usano il siero con quell'anticorpo prova a fare cosi' anche tu, penso sia una buona idea!

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miky76
Utente Junior



126 Messaggi

Inserito il - 29 gennaio 2009 : 16:45:41  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di miky76 Invia a miky76 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
salve

ho trovato una frase molto interessante

Blocking serum ideally should be derived from the same species in which the secondary antibody is raised.

quindi ha senso bloccare con goat serum visto che il mio secondo anticorpo e' fatto in goat

ora pero' mi sorge un nuovo dubbio

l'anticorpo lo pongo con goat serium o BSA?
perche' se mi ricordo bene... gli anticorpi funzionano meglio in BSA
ma non so

help di nuovo

grazie
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chick80
Moderatore

DNA

Cittā: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 29 gennaio 2009 : 17:02:39  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Mi sa che l'unica č provare. Mettilo in BSA, se proprio non funziona prova il siero. Purtroppo queste cose sono molto empiriche...

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