PCR- RFLP come funziona?

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kiaretta
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32 Messaggi

Inserito il - 10 febbraio 2009 : 14:46:31

Sicuramente � una domanda stupida, ma che mi sta creando qualche problema.
Come funziona questo tipo di PCR?
Faccio la PCR normale, ottengo l'amplificato e poi inserisco in provetta gli enzimi di restrizione che mi taglaino in siti specifici, ma come faccio a indentificare un eventuale SNP?

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 10 febbraio 2009 : 22:40:03

Beh dal nome RFLP = Restriction fragment length polymorphism (polimorfismo della lunghezza dei frammenti di restrizione)
sono polimorfismi che alterano un sito di restrizione, se � normale c'� il sito di restrizione e l'enzima taglia, se � mutato non c'� pi� il sito di restrizione e quindi l'enzima non taglia, avrai bande di lunghezza diversa!

Ovviamente con una PCR-RFLP puoi analizzare solo polimorfismi RFLP, non altri polimorfismi!

Gabriele
Utente

Prov.: Pisa
Citt�: Pisa

615 Messaggi

Inserito il - 10 febbraio 2009 : 23:09:11

Citazione:
Messaggio inserito da GFPina

Beh dal nome RFLP = Restriction fragment length polymorphism (polimorfismo della lunghezza dei frammenti di restrizione)
sono polimorfismi che alterano un sito di restrizione, se � normale c'� il sito di restrizione e l'enzima taglia, se � mutato non c'� pi� il sito di restrizione e quindi l'enzima non taglia, avrai bande di lunghezza diversa!

Oppure l'opposto, se � normale nn c'� il sito e la mutazione lo crea, in ogni caso avrai bande di lunghezza diversa visibili nel gel elettroforetico.

"Chi rinuncia alla libert� per la sicurezza, non merita n� la libert� n� la sicurezza. E finir� col perdere entrambe."

kiaretta
Nuovo Arrivato

32 Messaggi

Inserito il - 11 febbraio 2009 : 16:09:34

Grazie a GFPina e Gabriele!!
esame passato egregiamente con 29!