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Prov.: Catania
Citt�: Catania

30 Messaggi

Inserito il - 13 febbraio 2009 : 19:20:44

Ciao a tutti,
l'altro giorno ho effettuato un'estrazione di proteine da un pellet di circa 5 milioni di cellule.Il problema � che alla lettura il campione � venuto troppo diluito (neppure 1 ug/ul). Qualcuno sa suggerirmi un protocollo per poter fare riprecipitare le proteine e concentrarle quindi ridsciogliendole in un volume minore di RIPA ed inibitori di proteasi?
Grazie mille.
Ciao

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 13 febbraio 2009 : 20:02:31

Puoi riprecipitarle con TCA e acetone

http://labs.fhcrc.org/hahn/Methods/biochem_meth/tca_ppt.html

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Prov.: Catania
Citt�: Catania

30 Messaggi

Inserito il - 15 febbraio 2009 : 18:52:07

Grazie mille chick80...ma senti io stimo di avere circa 40 ug totali (in un volume di circa 400 ul) DI LISATO PROTEICO. Devo usare il carrier insulinico lo stesso?
Fammi sapereA presto.