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 citochine nel siero tramite ELISA
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Dadisk
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2 Messaggi

Inserito il - 14 febbraio 2009 : 16:02:18  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Dadisk Invia a Dadisk un Messaggio Privato  Rispondi Quotando

Ciao a tutti,
sto iniziando a dosare alcune citochine nel siero umano tramite ELISA. Mi sono resa conto che i livelli di citochine che mi aspetto dai controlli sani cadono al di sotto del detection limit della curva standard. Esiste un metodo per "concentrare" le proteine nel siero?
grazie mille!

chick80
Moderatore

DNA

Cittā: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 14 febbraio 2009 : 17:11:37  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Le potresti precipitare con TCA/acetone e poi risospendere in un volume minore.

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Dadisk
Nuovo Arrivato



2 Messaggi

Inserito il - 15 febbraio 2009 : 13:05:32  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Dadisk Invia a Dadisk un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ho paura di denaturarle, mi sembra un trattamento un po' aggressivo, considerando che se si modifica anche solo una piccola porzione l'anticorpo potrebbe non riconoscerle +! Che ne pensi di una qualche ultracentrifugazione? l'ho buttata a caso, non ne ho la + pallida idea...comunque grazie mille!
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chick80
Moderatore

DNA

Cittā: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 15 febbraio 2009 : 13:39:04  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Non saprei, in genere il TCA č il trattamento standard per precipitare le proteine. Se hai dei campioni che riesci a leggere con l'ELISA potresti provare a precipitarli/risospenderli e vedere se l'ELISA ti dā ancora lo stesso risultato.

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