Ciao a tutti, sto iniziando a dosare alcune citochine nel siero umano tramite ELISA. Mi sono resa conto che i livelli di citochine che mi aspetto dai controlli sani cadono al di sotto del detection limit della curva standard. Esiste un metodo per "concentrare" le proteine nel siero? grazie mille!
Ho paura di denaturarle, mi sembra un trattamento un po' aggressivo, considerando che se si modifica anche solo una piccola porzione l'anticorpo potrebbe non riconoscerle +! Che ne pensi di una qualche ultracentrifugazione? l'ho buttata a caso, non ne ho la + pallida idea...comunque grazie mille!
Non saprei, in genere il TCA č il trattamento standard per precipitare le proteine. Se hai dei campioni che riesci a leggere con l'ELISA potresti provare a precipitarli/risospenderli e vedere se l'ELISA ti dā ancora lo stesso risultato.