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maddy
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26 Messaggi

Inserito il - 26 febbraio 2009 : 14:34:04  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di maddy Invia a maddy un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti ho due quesiti da porre!qualcuno gentilmente potrebbe chiarirmi le idee?
grazie di cuore
1)Immaginate di avere un plasmide circolare a DNA e di volere mappare i suoi siti per EcoRI e BamHI. Quando digerite con EcoRI e separate il DNA su gel, si osserva una singola banda di 9kb. Identico risultato si ottiene dalla digestione con BamHI. La digestione con entrambi i plasmidi, si osservano due bande una di 6 kb e l’altra di 3 kb. Spiegate queste risultati. Disegnate una mappa dei siti di restrizione.


2)Avete a disposizione il mutante della beta-galattosidasi di E. coli e una banca genomica di E coli in un plasmide di E coli. Come usereste queste risorse per tentare di identificare il gene di E coli che codifica per la beta galattosidasi.

GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi

Inserito il - 28 febbraio 2009 : 00:43:58  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
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Messaggio inserito da maddy

Ciao a tutti ho due quesiti da porre!qualcuno gentilmente potrebbe chiarirmi le idee?
grazie di cuore
1)Immaginate di avere un plasmide circolare a DNA e di volere mappare i suoi siti per EcoRI e BamHI. Quando digerite con EcoRI e separate il DNA su gel, si osserva una singola banda di 9kb. Identico risultato si ottiene dalla digestione con BamHI. La digestione con entrambi i plasmidi, si osservano due bande una di 6 kb e l’altra di 3 kb. Spiegate queste risultati. Disegnate una mappa dei siti di restrizione.



Il plasmide è circolare, se tagliando con un enzima di restrizione hai una banda sola, vuol dire che taglia una volta. Quindi il tuo plasmide è di 9kb.
Tagliando con i due enzimi hai 2 bande: 6 kb + 3 kb = 9kb
Quindi prova a disegnarti il plasmide circolare, posizionare il sito di restrizione per il primo enzima e poi posizionare il secondo sito alla distanza corretta.


Citazione:
Messaggio inserito da maddy

2)Avete a disposizione il mutante della beta-galattosidasi di E. coli e una banca genomica di E coli in un plasmide di E coli. Come usereste queste risorse per tentare di identificare il gene di E coli che codifica per la beta galattosidasi.

Per questo dovresti aver studiato la teoria, nessuna idea???
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