carlo.m
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Inserito il - 24 marzo 2009 : 16:29:14
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Ciao a tutti. In molti kit per prep plasmidiche che fanno uso di colonne per affinità, il buffer di neutralizzazione contiene guanidina. Mi hanno detto che la guanidina è fondamentale per il legame del plasmide alla colonna e difatti l'ho sperimentato perchè facendo un buffer di neutralizzazione più classico e senza guanidina (ad esempio con l'acetato di potassio) la colonna lega pochissimo plasmide.
La domanda è: avete la ricetta di un buffer che sostituisca la guanidina, di cui non dispongo in laboratorio, con un altro composto che attivi la colonna per il legame al plasmide? (difatti la colonna non ha un buffer di attivazione, quindi credo che o la guanidina attiva la colonna oppure essa stessa fa da carrier). Ciao!
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