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Autore

Discussione

aileen
Nuovo Arrivato

Citt�: padova

4 Messaggi

Inserito il - 25 marzo 2009 : 18:19:20

sono alle prese con l'estrazione di proteine e vorrei provare ad utilizzare il protocollo della Trizol invitrogen in modo da poter estrarre amche rna dallo stesso campione.

mi viene indicato di eseguire lavaggi in guanidina cloruro prima di aggiungere sds per poi procedere con il surnatante.

non possedendo la guanidina cl, vorrei sapere se secondo voi è affidabile il beta-mercaptoetanolo che da quanto ho letto è un riducente e che quindi ha l'azione di rompere i ponti disolfuro.

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 25 marzo 2009 : 18:43:40

Cos� a occhio non mi sembrano proprio la stessa cosa!
Il cloruro di guanidina � un agente denaturante, il B-ME � riducente.

Io avevo provato una volta a sostituire il cloruro di guanidina con isotiocianato di guanidina per estrarre le dopo l'estrazione in Trizol, ma in realt� poi quelle proteine non le ho mai utilizzate!