RT-PCR con primer specifici

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Autore

Discussione

andrea78
Nuovo Arrivato

18 Messaggi

Inserito il - 01 aprile 2009 : 14:04:12

chi mi saprebbe dire quale concentrazione di primer utilizzare per la RT-PCR fatta con primer specifici per retrotrascrivere uno specifico mRNA?

miky76
Utente Junior

126 Messaggi

Inserito il - 01 aprile 2009 : 18:50:38

ciao

una RT-PCR la consideri come una PCR normale
solo che parti da un cDNA

si usano primer di solito a 10uM

GFPina
Moderatore

Città: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 01 aprile 2009 : 20:03:23

Citazione:
Messaggio inserito da miky76

si usano primer di solito a 10uM

scusa miky, immagino tu intendessi dire che si parte da primers concentrati 10uM e si usano come in una normale PCR 100-500nM (= 0.1-0.5uM), al massimo 1uM.

cin
Utente Junior

Prov.: Padova
Città: Padova

558 Messaggi

Inserito il - 02 aprile 2009 : 09:39:48

Lo penso anch'io.....

miky76
Utente Junior

126 Messaggi

Inserito il - 02 aprile 2009 : 10:35:38

ciao

si scusate

e' che mi dimentico che devo essere piu precisa
do molte cose per scontate!

ops....

ma si... PCR normale= 0.1-0.5uM per i primer