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violettablu
Nuovo Arrivato



6 Messaggi
Inserito il - 20 aprile 2009 : 18:05:50  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di violettablu Invia a violettablu un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao ragazzi,
secondo voi posso preparare da me marker per gel nativo?
Se preparo un mix di proteine a peso molecolare noto, funzionano come markers?

domi84
Moderatore

Smile3D

Città: Glasgow


1724 Messaggi
Inserito il - 20 aprile 2009 : 18:34:31  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Bè...penso proprio di sì. I marker sono proteine a peso noto....
Ovviamente devi settare le quantità di proteine da mettere per fare i marker...altrimenti trovi delle bande enormi...
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...
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coccinellas
Utente Junior

scienziato pazzo

Città: l'isola che non c'è


138 Messaggi
Inserito il - 20 aprile 2009 : 19:38:48  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di coccinellas Invia a coccinellas un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
...........e come faccio a sapere qual'è la quantità di proteine da usare ?
Poi mi viene un'altro dubbio: nel gel nativo le proteine non corrono solo in base al peso molecolare, ma anche in base alla carica, questo può falsare la determinazione del peso molecolare?
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violettablu
Nuovo Arrivato



6 Messaggi
Inserito il - 20 aprile 2009 : 19:59:31  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di violettablu Invia a violettablu un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Si infatti ,come faccio a sapere quanta proteina devo usare?
E poi secondo voli quale proteine mi conviene usare visto che l'enzima di mio interesse ha PM di 36 KDa come monomero e 72KDa come dimero.
GRAZIE
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 20 aprile 2009 : 20:00:42  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Scusa, ma che vantaggio avresti? Dovresti comunque comprare le proteine ad un alto grado di purezza, non credo risparmieresti molto no?
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violettablu
Nuovo Arrivato



6 Messaggi
Inserito il - 20 aprile 2009 : 20:10:43  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di violettablu Invia a violettablu un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
..............non è una questione di risparmio ecomonico, è una questione di tempo.......... e poi potrei utilizzare proteine che già ho in lab!
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 20 aprile 2009 : 20:12:57  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Scusa, ma il risparmio di tempo ce l'hai usando il marker bello e fatto no?

Ad ogni modo, se vuoi provare questa è la composizione del marker "NativeMark" della Invitrogen. Non dicono le quantità però.


        protein           |  MW
--------------------------+-------
IgM Hexamer               | 1236
IgM Pentamer              | 1048
Apoferritin band 1        |  720
Apoferritin band 2        |  480
B-phycoerythrin           |  242
Lactate Dehydrogenase     |  146
Bovine Serum Albumin      |   66
Soybean Trypsin Inhibitor |   20
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