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MISTERXX
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
 Inserito il - 06 maggio 2009 : 21:26:28
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raga sono completamente in palla aiutatemi. allora:il mio composto ha peso molecolare MW=213,2 e ho il liofilizzato di 100ug. devo diluirlo in DMSO alla concentrazione finale di 5mM COME FACCIO???? AIUTO
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 06 maggio 2009 : 21:39:27
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Il peso molecolare è di 213.2 g/mol. Questo vuol dire che 1 mole pesa 213.2 g.
Tu hai 100 ug quindi hai
100*10-6 g / 213.2 g/mol = 4.69 * 10^-7 mol = 0.469 umol
Per fare una soluzione 5mM devi mettere 5 mmol in 1l ovvero 5 umol in 1ml
tu hai 0.469 umol quindi:
0.469 umol : x ml = 5 umol : 1 ml |
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MISTERXX
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
Inserito il - 06 maggio 2009 : 22:03:11
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| grazie!!! perchè ti spiego nel mio esperimento ho bisogno in ciascun well da 1ml rispettivamentedi 50uM, 250uM,1250uM del mio composto. quindi considerando che x=93,8ul, in quel volume ho 5mM di composto e per trovare i miei valori devo fare 5mM:93,8=1,250um:x giusto? e poi il volume del pozzetto mi cambia la concentrazione? grazieeee davvero sono in tilt e sono in lab |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 06 maggio 2009 : 22:39:12
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Il volume dello stock 5 mM non ha alcuna importanza. Una volta che hai fatto lo stock che tu ne abbia 1 litro o 10 ul non cambia nulla (a parte il numero di volte che lo puoi usare ovviamente!!!)
Parte 1 del problema: fare uno stock 5mM, e qui ci siamo.
Parte 2 una volta che hai ottenuto lo stock 5mM devi mettere nel tuo pozzetto da 1ml un tot di questo stock in modo da avere, ad es. 50uM.
Siccome 50 uM è 1/100 di 5 mM dovrai semplicemente usare lo stock 1:100, cioè 1 ul in 100 ul ossia 10 ul di stock in 1 ml di soluzione.
Per fare la soluzione 250 uM che è 5 volte più concentrata (250 = 50 * 5) dovrai metterne 5 volte tanto, quindi 50 ul
Per fare 1250 uM che è 5 volte ancora più concentrata (1250 = 250 * 5) dovrai metterne 5 volte in più quindi 50*5 = 250 ul |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 06 maggio 2009 : 22:42:26
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PS: nota che mettendo 250 ul in 1 ml arrivi a 1.250 ml di soluzione finale e quindi la [] cambierà.... personalmente consiglio di fare uno stock più concentrato se possibile (es. 500mM) in modo che l'aggiunta del trattamento non alteri il volume finale.
Inoltre se questo trattamento come immagino sarà fatto su delle cellule mettere nel terreno 1/4 del volume di DMSO le ucciderà immediatamente... |
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Gabriele
Utente
Prov.: Pisa
Città: Pisa
615 Messaggi |
Inserito il - 06 maggio 2009 : 23:34:54
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Ti fanno stare in lab senza saper calcolare una concentrazione? |
"Chi rinuncia alla libertà per la sicurezza, non merita né la libertà né la sicurezza. E finirà col perdere entrambe." |
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MISTERXX
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
Inserito il - 07 maggio 2009 : 01:52:00
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| grazie chick80!!!! |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 07 maggio 2009 : 19:40:12
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Citazione:
Messaggio inserito da chick80
Il volume dello stock 5 mM non ha alcuna importanza. Una volta che hai fatto lo stock che tu ne abbia 1 litro o 10 ul non cambia nulla (a parte il numero di volte che lo puoi usare ovviamente!!!)
Appunto!!!
Questi esperimenti sono impossibili!
Citazione:
Messaggio inserito da chick80
50 uM ... 10 ul
250 uM ... 50 ul
1250 uM ... 250 ul
totale = 310ul
visto che ne hai 93,8ul non puoi farlo, al massimo puoi fare solo le prime 2 concentrazioni!
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
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