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Klo
Nuovo Arrivato
Prov.: Roma
107 Messaggi |
 Inserito il - 07 maggio 2009 : 22:10:13
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Ciao a tutti!
Allora una settimana fa il mio professore ci ha chiesto di portare un lavoro: Identificare sequenze regolative umane costruendo un vettore.
Bene a me è venuta in mente una tecnica usata a questo scopo su altri organismi,ossia l'enhancer trap. Ossia prendo il mio promotore minimo,il gene reporter (GFP per esempio) e faccio integrare il costrutto, questo si inserisce a caso nel genoma, ma se integra a valle di un enhancer il mio gene verrà espresso e io vedrò la fluorescenza nel tessuto in cui l'enhancer si esprime... Ma tutto questo nell'uomo non si può fare, ossia non posso fare diventare nessuno fluorescente. Mi chiedevo se cmq i risultati di questa tecnica, applicata su mammiferi in generale, possono essere validi anche per l'uomo, oppure se devo pensare a qualcosa di totalmente diverso.
Grazie mille!
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Ignis fatuus
Nuovo Arrivato
14 Messaggi |
Inserito il - 07 maggio 2009 : 22:44:41
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| Ciao, la tecnica non è delle più recenti, ma è utilizzabile. Il reporter da usare non è però la GFP, bensì un marker chimerico noto come Beta-Geo (Beta-Gal + resistenza a G418). |
”Slumber, watcher, till the spheres
Six and twenty thousand years
Have revolv’d, and I return
To the spot where now I burn."
Polaris, H. P. Lovecraft.
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Ignis fatuus
Nuovo Arrivato
14 Messaggi |
Inserito il - 07 maggio 2009 : 22:46:33
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| P.S.: Naturalmente dovresti approntare delle colture cellulari. |
”Slumber, watcher, till the spheres
Six and twenty thousand years
Have revolv’d, and I return
To the spot where now I burn."
Polaris, H. P. Lovecraft.
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Klo
Nuovo Arrivato
Prov.: Roma
107 Messaggi |
Inserito il - 07 maggio 2009 : 22:56:03
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| grazie Ignis Fatuus , ma come potrei vedere il tessuto di espressione, ossia dove si esprime se uso colture cellulari? |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 08 maggio 2009 : 09:43:35
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Le cellule deriveranno da un certo tessuto...
ovviamente dovresti avere tutte le precauzioni del caso in quanto appunto sono colture cellulari e non un tessuto all'interno di un organismo, quindi non è detto che ciò che vedi su cellule in coltura sia effettivamente vero anche nel tessuto intatto. |
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Identificazione di sequenze regolative nell'uomo
