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carlaorru
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37 Messaggi |
 Inserito il - 11 maggio 2009 : 18:47:32
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Ciao a tutti!
Sto frequentando un laboratorio di PMA (procreazione medicalmente assistita)dove conto di preparare la tesi di laurea specialistica in biologia cell.molecolare. Avrei bisogno di sapere se qualcuno puo' fornirmi un protocollo di FISH su liquido seminale da consultare e valutare, perchè vorrei trattare i campioni con questa tecnica (che ho eseguito solo su campioni di sangue) ed effettuare una comparazione tra morfologia e altri parametri tra cui quello citogenetico.Vi ringrazio moltissimo, aspetto fiduciosa!
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ukitel
Nuovo Arrivato
78 Messaggi |
Inserito il - 16 maggio 2009 : 13:16:29
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La FISH su liquido seminale si può fare tranquillamente, ma è un po' difficile a causa dell'estrema condensazione del DNA nello spermatozoo, che rende impossibile l'accesso alla sonda, senza una buona denaturazione.
Da quello che ho letto posso consigliarti una denaturazione chimica in NaOH (parti da 3 M per 2 minuti, ma funziona con concentrazioni molto molto più basse), che oltre a decondensare il DNA, lo distende, e puoi controllarne l'effettiva riuscita al microscopio a contrasto di fase (i nuclei diventano pallidi e aumentano la loro dimensione di 1-2 volte), prima di procedere alla FISH.
Se cerchi un protocollo puoi contattarmi... |
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carlaorru
Nuovo Arrivato
37 Messaggi |
Inserito il - 21 maggio 2009 : 08:39:50
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Sono riuscita a leggere solo ora la tua risposta (causa troppi impegni!). Grazie mille per le informazioni che mi hai dato ukitel. Nel caso avessi bisogno di altre info sul protocollo posso contattarti sempre qui? Buon lavoro e grazie ancora. |
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FISH su liquido seminale
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