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andreactf
Nuovo Arrivato



5 Messaggi

Inserito il - 11 maggio 2009 : 21:23:32  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di andreactf Invia a andreactf un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
se io costituisco sonde di dna con random priming o nick traslation
ottengo sonde a doppio filamento contenente nucleotidi marcati. ma
questa sonda che in costanza deve fare da rivelatore come fa a fare un
ibrido con la specie che ricerco se gia lei è a doppio filamento?
grazie mille



Schuldiner86
Utente Junior

Biotech

Prov.: Viterbo
Città: Bologna


581 Messaggi

Inserito il - 11 maggio 2009 : 23:20:05  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Schuldiner86  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Schuldiner86  Invia a Schuldiner86 un messaggio Yahoo! Invia a Schuldiner86 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Al momento dell'ibridazione denaturi la sonda lavorando sulla temperatura, sul pH e sulla concentrazione di sali ed ottenendo quindi diverse condizioni di stringenza. Dopodiché effettui dei lavaggi a condizioni di stringenza via via più elevate che ti permettono di eliminare la sonda che non si è ibridata con il target che è fissato in qualche modo ed eventuali sonde che si sono legate in modo aspecifico. Oltre a quelle due tecniche puoi usare comunque anche l'end tailing per sonde a doppio filamento, ma la sensibilità è minore.



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