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Autore Discussione  

lella
Nuovo Arrivato


Cittą: Melfi / Teramo


14 Messaggi
Inserito il - 01 aprile 2006 : 17:53:14  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di lella  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di lella Invia a lella un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti!!!
Sono alle prese con gli appunti del mio prof ma non riesco a capire bene la differenza tra hot star pcr e booster pcr. qualcuno sa darmi una mano?
Grazie

AleXo
Moderatore

OrniAle

Prov.: Estero
Cittą: San Francisco, California


1550 Messaggi
Inserito il - 01 aprile 2006 : 20:18:22  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di AleXo  Invia a AleXo un messaggio AOL Invia a AleXo un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
la prima č un metodo per ridurre l'aspecifico in una rezione di pcr.
Nell'hotstart uno o + componenti di rezione sono separati prima che inizino i cicli di amplificazione, questo perkč ad es. la Taq č processiva anche a basse temperature.
Lo si fa con delle speciali cere commerciali ad hoc, uno dei metodi + comuni prevede l'aggiunta di questa "wax beads" al mix di pcr, che galleggiano e solidificano in cima; su questo strato si aggiunge poi una pol termostabile nel suo buffer. Al primo primo step di denaturazione (l'hot start) la cera fonde permettendo il contatto dei vari componenti fra loro.

la booster pcr č un altro metodo per aumentare le rese quanto il tuo template di partenza č molto diluito,sinceramente non ne so molto e non mi pare molto diffusa.
E' una reazione bifasica, dove nel primo step si lavora con degli eccessi di primer che poi vengono normalizzati nel secondo.
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lella
Nuovo Arrivato


Cittą: Melfi / Teramo


14 Messaggi
Inserito il - 02 aprile 2006 : 10:10:50  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di lella  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di lella Invia a lella un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie mille per l'aiuto!!
In effetti nella hot star non riuscivo a capire come si potesse aggiungere la Taq dopo il primo step di denaturazione!!
Grazie ancora!!!
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chick80
Moderatore

DNA

Cittą: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 02 aprile 2006 : 10:14:05  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Nota che e' hot start non hot star!
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lella
Nuovo Arrivato


Cittą: Melfi / Teramo


14 Messaggi
Inserito il - 02 aprile 2006 : 11:11:27  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di lella  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di lella Invia a lella un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ops!
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