GFPina
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Cittā: Milano
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Inserito il - 01 agosto 2009 : 15:41:33
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10U/microlitri sono 10 Unitā/microlitri. La concentrazione di enzimi viene sempre espressa in UNITA'. Nel caso della M-MLV ad es. Citazione: One unit is the amount of enzyme required to incorporate 1nmol of deoxynucleotide into acid-precipitable material in 10 minutes at 37°C. (da M-MLV Reverse Transcriptase - Promega)
Dovresti gurdare quanto č concentrata la tua M-MLV (ad es. 100U/ul, 200U/ul...) e fare i conti di quanta ne metti nella soluzione finale. Leggit queste pagine per vedere come si fanno le diluizioni: http://www.molecularlab.it/principi/calcoli-laboratorio/diluizioni.asp
Una piccola nota:
Citazione: Messaggio inserito da mical
per fare una PCR deve aggiungere 10U/microlitri M-MLV...
La M-MLV č una retrotrascrittasi e serve per fare la retrotrascrizione (RT), non la PCR. La aggiungi in una mix di PCR solo nel caso tu stia facendo una RT-PCR one step.
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