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tambua
Nuovo Arrivato
50 Messaggi |
 Inserito il - 27 agosto 2009 : 17:05:27
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Salve ragazzi,
sto studiando i sistemi di espressione basati su Baculovirus, però mi è sorto un dubbio: cosa si intende per supernatante della coltura cellulare? Questo virus non crea un effetto citopatico? Il testo riporta "il supernatante di queste cellule infette conterrà praticamente il virus ricombinante che verrà prelevato ed amplificato; qualcuno è in grado di spiegarmi questo passaggio?
Sicuramente non ho chiaro il concetto di supernatante da una coltura e di amplificazione del virus (dove? in altre cellule?).
Grazie a chi vorrà aiutarmi
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Giuliano652
Moderatore
Prov.: Brescia
6941 Messaggi |
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tambua
Nuovo Arrivato
50 Messaggi |
Inserito il - 27 agosto 2009 : 17:53:20
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:)
Grazie Giuliano,
E per amplificare il mio virus devo utilizzare il "supernatante" come inoculo per infettare una nuova coltura di cellule fresche vero?
Scherzi a parte sapresti consigliarmi un buon testo in cui sia spiegata bene la titolazione virale? Intendo concetti quali MOI,pfu/ml ecc.... perchè ho letto dei post precedenti e dalle risposte che hai dato mi è sembrato che ci lavori a gomito con i virus :)
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Giuliano652
Moderatore
Prov.: Brescia
6941 Messaggi |
Inserito il - 27 agosto 2009 : 18:20:39
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ci lavoravo, e sono tutt'ora una mia passione. Però ora faccio tutt'altro :-)
Testi per la titolazione non saprei, ogni testo di virologia ha almeno le basi, certo non hanno dei veri e propri protocolli, ma la teoria la spiegano. Esiste però un testo di tecniche di virologia (di cui non ricordo né titolo, né autore, né lingua, se italiano o inglese) che era nel mio lab. Se ti interessa faccio un giro di telefonate/email e in qualche giorno potrei riuscire a postarti il titolo
PS: per "amplificazione" si intende un'infezione fatta allo scopo di avere più virus di quanto se ne abbia in quel momento. Segue alcune regole, tipo ci vuole basso titolo virale, cellule competenti eccetera, ma normalmente si moltiplica di molti ordini di grandezza la quantità di virus a nostra disposizione (e i virioni nuovi si trovano nel supernatante, o surnatante (parola che faceva venire i brividi alla mia veccha prof)) |
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tambua
Nuovo Arrivato
50 Messaggi |
Inserito il - 27 agosto 2009 : 20:31:26
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 Con moltissimissima calma sì mi piacerebbe sapere il nome del libro. |
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tambua
Nuovo Arrivato
50 Messaggi |
Inserito il - 28 agosto 2009 : 14:52:42
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Giuliano chiedo a te che sei diventato il mio mentore (scherzo),
cosa si intende per promotore minimo di CMV?
Ho anche fatto una ricerca su google alla voce "CMV minimal promoter" e penso di aver capito che sia la sequenza minima in grado di permettersi alla RNA polimerasi di legarsi e trascrivere...mi sembra però un pò pochetto. |
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Giuliano652
Moderatore
Prov.: Brescia
6941 Messaggi |
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bite20
Nuovo Arrivato
13 Messaggi |
Inserito il - 28 agosto 2009 : 19:32:55
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Io a suo tempo ho trovato molte info interessanti sui vari manuali dei kit in commercio, ce ne sono di tutti i tipi, evito i nomi per non fare pubblicità, ma iniziano tutti con il prefisso baculo-
Buona ricerca.. a presto. |
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Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 28 agosto 2009 : 19:44:31
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Non resisto a fare l'appunto di saccenteria: ricorda, tambua,
che il sistema di espressione baculovirale non è un virus
ma un vettore, e come tale NON replica. Trasduce soltanto. |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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tambua
Nuovo Arrivato
50 Messaggi |
Inserito il - 24 settembre 2009 : 17:36:35
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 Grazie
Macchè saccenteria, l'aiuto tra biologi e futuri biologi non è mai saccenteria... anzi 
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Sto baculovirus
Didattica
