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terreno85
Utente Junior




235 Messaggi
Inserito il - 16 settembre 2009 : 13:47:15  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di terreno85 Invia a terreno85 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
VOGLI CLONARE UN GENE DI 1563BP CHE PRESENTA UN UNICO SITO DI TAGLIO PER NDEI IN POSIZIONE 432.
RIESCO A CLONARLO IN UN PET (VEDI ALLEGATO) USANDO SMAI (2317) E ECORI(654)PERCHE LO VOGLIO FONDERE ALLA SEQUENZA NUSA(VEDI ALLEGATO), VOGLIO VALUTARE SE IL CLONAGGIO è ANDATO A BUON FINE, DIGERISCO IL VETTORE/INSERTO CON NDEI E ECORI, NDEI TAGLIA SIA IL VETTORE IN POSIZIONE (2317) SIA ALL'INTERNO DEL GENE A (432), ECORI TAGLIA SOLO NEL VETTORE IN POSIZIONE (654)

I RISULTATI CHE DEVO OTTENERE SONO QST:

VETTORE NUDO: 5617 E 1663 ( 2 FRAMMENTI DI DNA)
VETTORE CON INSERTO : 5617 , 1946, 1134 ( 3 FRAMMENTI)

NON RIESCO A CAPIRE COME RICAVARE CON I CALCOLI MATEMATICI QST 3 FRAMMENTI ??? MI AIUTATE !!
Una teoria può esserre provata da un esperimento. Ma nessun percorso guida dall'esperimento alla nascita di una teoria

terreno85
Utente Junior




235 Messaggi
Inserito il - 16 settembre 2009 : 13:48:16  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di terreno85 Invia a terreno85 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
HO DIMENTICATO L'ALLEGATO ECCOLO

Allegato: TB288.pdf
61,84 KB
Una teoria può esserre provata da un esperimento. Ma nessun percorso guida dall'esperimento alla nascita di una teoria
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Neuroscience
Utente



659 Messaggi
Inserito il - 16 settembre 2009 : 14:26:48  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Neuroscience Invia a Neuroscience un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
iniziamo con SmaI che è in posizione 721 e non 2317

potresti utilizzare un programma grafico per fare questo tipo di calcoli
tipo Vector NTI a pagamento
o pDRAW gratuito
o altri ancora

ad occhio e croce dovresti disegnare una mappa del vettore 'nudo' e clonato con tutti gli enzimi e le varie posizioni. Con una calcolatrice vedi le distanze

-------------|EcoRI1563<<<<<<<<<<<<<<<<<<<<Nde432<<<<<<<SmaI0|SmaI721---------------Nde2317------

-------------|EcoRI<<<<<1132bp<<<<<<<<<<<<Nde<<<<<<<432bp<<<<+-------1600bp--------Nde------

<<<< cDNA
- Vettore

Se ho capito bene il tuo inserto è lungo 1563 bp, Nde si trova a 432 nel tuo cDNA che unito al frammento del vettore 2317-721 = 1600 bp darà un fraammento di 432+1600 basi = circa 1946
EcoR I e Nde daranno un frammento di 1563-432= crica 1134
il resto del vettore 5617

fatti una mappa scritta o con un programma e vedi che ti trovi facilmente
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terreno85
Utente Junior




235 Messaggi
Inserito il - 18 settembre 2009 : 18:14:23  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di terreno85 Invia a terreno85 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ok grazie ora ci sono !
Una teoria può esserre provata da un esperimento. Ma nessun percorso guida dall'esperimento alla nascita di una teoria
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