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Mandy
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 17 settembre 2009 : 11:34:23

Salve a tutti, sono nuova da queste parti ma vi leggo spesso, spero possiate aiutarmi...dunque...sto usando il kit di clonaggio p-Gem che finora non mi ha mai dato problemi. Questa settimana da clonaggio gi� collaudato altre volte non ho ottenuto NESSUNA COLONIA!!! pensando ad un errore di distrazione/sperimentale ho ripetuto tutto da capo usando sia controllo positivo che background control...ma non � cresciuto nulla nemmeno in queste piastre!!! non so che pensare

Un grazie a chi mi dar� un aiuto...o almeno un conforto!

germy
Nuovo Arrivato

74 Messaggi

Inserito il - 25 settembre 2009 : 22:29:30

i kit hanno le scadenze in alcuni casi...

Neuroscience
Utente

659 Messaggi

Inserito il - 25 settembre 2009 : 23:06:26

� il pGEM-T ?
Hai usato la Taq o pfu per la pcr? rapporto vettore:frammento giusto?
funziona la ligasi?

Se ci dai qualche dettaglio in pi� ti potremmo essere maggiormente di aiuto

Mandy
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 28 settembre 2009 : 10:21:55

non ho pi� scritto sul forum perch� le colonie sono comparse dopo 48h! non mi so spiegare il perch� (forse una leggera perdita di competenza delle cellule?) ma il clonaggio � andato a buon fine.
Grazie per i vostri suggerimenti!