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marok
Utente Junior
150 Messaggi |
 Inserito il - 18 settembre 2009 : 08:56:45
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Ciao a tutti! Volevo chiedere se qualcuno conosce a che temperature la kanamicina si inattiva (o se avete una cinetica di inattivazione). Ho provato a cercare su internet, ma niente.
Lo chiedo perchè ho fatto dei terreni per selezionare embrioni trasformati, ma crescono tutti troppo bene e siccome ho aggiunto la kanamicina quando ancora il terreno era ben caldo (penso sui 60 gradi celsius) non vorrei che mi si sia scassata. Visto anche che in passato ha sempre funzionato e la trasformazione ha una resa assai scarsa con perdita di parecchio materiale... e dubito che questa volta sia stato graziato con una super efficienza di trasformazione.
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 18 settembre 2009 : 11:45:33
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Non so, non ho idea e non ho cercato niente.
Però per essere sicuro non ti conviene rifare le piastre oppure mettere la kanamicina sulla piastra già solidificata? |
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Neuroscience
Utente
659 Messaggi |
Inserito il - 18 settembre 2009 : 18:21:15
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sotto i 60°C vai tranquillo, sopra si inattiva di sicuro.
Ovvio che ci sia anche una relazione di tempo dipendenza... una cosa è restare a 58°C x una notte, altra cosa se è per soli 30 minuti.
In genere la uso quando il terreno è tra i 40 e 50°C, ma anche tra 50-60°C è ok se è solo per poco.
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 18 settembre 2009 : 18:24:35
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Si ma io mi chiedo: "vale la pena di rischiare?"
Magari funziona ma non benissimo, io non starei tanto tranquilla, preferirei ripreparare le piastre che non dover buttare via tutto! |
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Neuroscience
Utente
659 Messaggi |
Inserito il - 18 settembre 2009 : 18:27:05
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bhè sì, specie se non sai nemmeno la temperatura in maniera precisa... e ci sono risultati strani con questa piastra..
Di certo non c'è mai una inattivazione del 100,00% ed una da 0%... anche una inattivazione del 30% potrebbe falsare i risultati sperimentali.
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marok
Utente Junior
150 Messaggi |
Inserito il - 18 settembre 2009 : 22:34:11
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Bè nei risultati strani sono coinvolte 60 piastre per cui è abbastanza preoccupante.
Comunque ho già ripreparato tutto il terreno necessario con una concentrazione di kanamicina un pò più alta.
Ho fatto questa domanda perchè volevo essere sicuro che la colpa non fosse della kanamicina, anche perchè ho usato una linea diversa dal solito e quindi escludendo l'antibiotico la cosa più probabile è che sia una linea più resistente del normale.
Grazie per i consigli, sempre gentilissimi!  |
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Terreni: Kanamicina e inattivazione al calore
Didattica e Relazioni
