|
stepbiotech
Nuovo Arrivato
9 Messaggi |
 Inserito il - 01 ottobre 2009 : 17:03:48
|
ciao a tutti, ho un problema con una Real Time PCR.
Ho disegnato un sistema sul gene prfA di Listeria monocytogenes, il quale testato su ceppo ATCC ed isolato clinico, si mostra funzionante.
Testando campioni biologici invece sono incappato in alcuni problemi:
- da liquor ho ottenuto un Ct medio di 35 (treshold 0.01 con Rotorgene 3000) mentre l'esame culturale ha manifestato positività entro le 24 ore (caso rarissimo, di solito la crescita richiede 48 ore)
- da sangue intero provetta EDTA da emocromo (raccolto in parallelo ai liquor citati sopra) ho risultati sempre negativi, nonostante in un caso abbia avuto positività su emocoltura.
come è possibile che abbia queste difficoltà nei campioni di sangue? 
Il mio controllo interno (endogeno) ha Ct ottimi (19 per il sangue, 23 per i liquor).
Grazie in anticipo!
Stefano
|
|
Real Time PCR per Listeria monocytogenes
Didattica
Inserito il - 26 ottobre 2009 : 13:34:27
