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Ce
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
 Inserito il - 20 maggio 2006 : 19:06:59
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Ciao a tutti...
Qualche mese fa stavo seguendo un stage sul Dna ricombinante e per lisare delle cellule batteriche avevo usato un altro strumento al posto del solito SDS per evitare di danneggiare le cellule stesse.
Tuttavia pur avendo appuntato il nome devo aver capito male e aver segnato un nome sbagliato.
Giusto per darvi un'idea si trattava (scusatemi ora per la mia imprecisione^^) di una specie di trapano la cui punta doveva essere inserita nell'eppendorf contenente la soluzione. Produceva un fischio penetrante tanto che era necessario avvicinarsi dotandosi di una cuffia.
Ora io avevo appuntato il nome "sonnizzatore", ma dubito sia esatto, anche se credo che il nome vero non si debba discostare molto.
Sapete per caso il nome vero dello strumento?
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Gabriele
Utente
Prov.: Pisa
Città: Pisa
615 Messaggi |
Inserito il - 20 maggio 2006 : 22:16:18
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| Sonicatore |
"Chi rinuncia alla libertà per la sicurezza, non merita né la libertà né la sicurezza. E finirà col perdere entrambe." |
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AleXo
Moderatore
Prov.: Estero
Città: San Francisco, California
1550 Messaggi |
Inserito il - 21 maggio 2006 : 01:00:40
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Sonicatore, decisamente  |
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Ce
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
Inserito il - 21 maggio 2006 : 22:06:35
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 grassie |
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cin
Utente Junior
Prov.: Padova
Città: Padova
558 Messaggi |
Inserito il - 22 maggio 2006 : 13:12:25
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| Da noi lo chiamiamo anche potter o ultra turrax (che è la marca) |
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cin
Utente Junior
Prov.: Padova
Città: Padova
558 Messaggi |
Inserito il - 22 maggio 2006 : 13:15:12
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| A proposito, noi vorremmo passare al metodo a biglie, quello della Qiagen per essere precisi, qualcuno di voi lo usa? come vi siete trovati? |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 23 maggio 2006 : 19:28:38
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Veramente sono due cose diverse!
Il sonicatore funziona ad ultrasuoni, se volete approfondire guardate questo link:
http://www.galenotech.org/sonicazione.htm
invece il "potter" è un omogemizzatore e fa una lisi meccanica è praticamente la versione meccanica del pestello! "Potter" penso che sia il nome di chi l'ha inventato anche se questo termine viente utilizzato per indicare lo strumento! |
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Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 24 maggio 2006 : 01:45:05
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Quoto.
Da noi lo chiamano addirittura "omogenizzatore di Potter-Elvehjem"
(ci dev'essere qualche contesa riguardo al brevetto! ).
Pare sia semplicemente un pestello che ruota contro le pareti di
un tubo di vetro:decisamente uno strumento meno raffinato del sonicatore.
..ma che roba è quella delle "biglie"  ??
una tecnica nuova ?
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Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 24 maggio 2006 : 02:44:47
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Citazione:
..ma che roba è quella delle "biglie" ??
una tecnica nuova ?
Non credo sia così nuova... semplicemente e' una lisi meccanica fatta con biglie di vetro. A volte si accoppia con il sonicatore. |
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cin
Utente Junior
Prov.: Padova
Città: Padova
558 Messaggi |
 Inserito il - 24 maggio 2006 : 15:33:51
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Pardon....Sì in effetti il sonicatore è quello che noi chiamiamo ultrasuoni, normalmente lo utilizziamo per pulire i filtri in acciaio delle colonne per HPLC,ma se avete dell'oro e dell'argento provate a mettere le vostre gioie in un becherino, con un po' di acqua e del cif (il detersivo per pulire i lavandini) e lasciate il tutto nel sonicatore per 15 min e vi sarete risparmiati un tocco da 20 euro dal gioielliere per pulizia gioielli.
Tu Nico hai provato ad usare le biglie visto che le conosci? |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 24 maggio 2006 : 22:18:05
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| no, mai usate, ma credo che non siano cosi' utili a meno di lavorare con tessuto con molto connettivo (es. muscoli) |
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cin
Utente Junior
Prov.: Padova
Città: Padova
558 Messaggi |
 Inserito il - 25 maggio 2006 : 14:35:38
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Noi lavoriamo con il tessuto adiposo principalmente, ma ci capita di tutto visto che dei topi e dei ratti mettono via il più possibile, inoltre gli adipociti dimmi dove non sono implicati....per cui abbiamo gente che lavora su osso, chi sull'endometrio, chi sull'ipofisi ed ogni cosa che gli viene in mente al capo......
Sostanzialmente volevamo passare alle biglie per evitare la cross contaminazione tra campione e campione che si potrebbe avere con l'uso dell'omogeinizzatore, perchè per quanto laviamo bene la fresa tra un campione ed un altro non è detto che qualcosa non passi.
Io ho provato a cercare le frese usa e getta, ma avremmo dovuto cambiare il tipo di omogeneizzatore ed inoltre costano abbastanza.
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Cangrande
Utente Junior
Prov.: Verona
280 Messaggi |
Inserito il - 25 maggio 2006 : 18:06:17
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| Alcuni miei colleghi utilizzano le biglie e mi hanno detto che sono molto molto comode da usare... ma personalmente devo ancora testarle. |
Magnifico atque victoriosissimo Domino, Domino Kani Grandi de la Scala. |
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AC
Nuovo Arrivato
45 Messaggi |
Inserito il - 25 maggio 2006 : 22:07:26
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ciao a tutti. Io ho usato qualche volta le biglie. Praticamente operi una rottura meccanica delle cellule, ma devi tenere presente che alcuni protocolli prevedono (una volta aggiunte le biglie) di vortexare per qualche minuto il campione. Se hai tanti campioni e un solo vortex, ... ci metti un pò. Ma con me hanno funzionato.
Ciao |
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moonycinzia
Utente Junior
234 Messaggi |
Inserito il - 11 marzo 2007 : 17:48:12
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Citazione:
Messaggio inserito da AC
ciao a tutti. Io ho usato qualche volta le biglie. Praticamente operi una rottura meccanica delle cellule, ma devi tenere presente che alcuni protocolli prevedono (una volta aggiunte le biglie) di vortexare per qualche minuto il campione. Se hai tanti campioni e un solo vortex, ... ci metti un pò. Ma con me hanno funzionato.
Ciao
Le biglie o glass beads di cui parlate sono utile anche nella lisi meccanica della parete dei lieviti.Io le uso per purificare proteine ricombinanti da lievito,appunto.Molto semplice,si vortexa e si mette in ghiaccio per circa mezz'ora,un minuto vortexi-un minuto in ghiaccio;poi si centrifuga et voilà ecco il super da caricare in colonna per la purificazione.
Fin'ora non ho ancora purificato da batteri ma so che la sonicazione può dare problemi a volte,qualcuno sa dirmi quali e come ovviare? |
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tommasomoro
Utente Junior
358 Messaggi |
Inserito il - 11 marzo 2007 : 18:12:07
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"constant cell disruptor"
per batteri e lieviti quando lisi decine di grammi di pellet
e' il massimo
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Balsamo del Canadà
Nuovo Arrivato
Prov.: Verbano-Cusio-Ossola
Città: Verbania
97 Messaggi |
Inserito il - 12 marzo 2007 : 11:33:24
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Citazione:
Messaggio inserito da cin
A proposito, noi vorremmo passare al metodo a biglie, quello della Qiagen per essere precisi, qualcuno di voi lo usa? come vi siete trovati?
Io nel mio tirocinio ho usato il kit Instagene Matrix della Qiagen. L'estrazione è venuta bene e non è poi così lunga da fare. In un paio di ore ho estratto il DNA genomico di circa 30 ceppi batterici (io usavo Aeromonas). L'unica pecca è che la purezza del DNA non è proprio elevatissima. Usando infatti il DNA per sucessive PCR mi venivano alcune bande aspecifiche nonostante si cambiassero le condizioni di amplificazione.
Il metodo è cmq valido ma sarebbe meglio accoppiarlo ad un passaggio di purificazione o estrarre direttamente tramite bollitura e colonnine di purificazione. (esistono tantissimi kit che lo permettono).
Ciao Ciao |
-B.del C.- |
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pakgio
Nuovo Arrivato
Città: milano/torino
3 Messaggi |
Inserito il - 14 novembre 2007 : 17:14:17
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ciao a tutti...nuovo iscritto...
domanda da 1x10e6 di dollari o euro che valgon di più:
come si intona un sonicatore???
qualcuno ne ha idea? quali sono i paramentri da tener presente??
thanx
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Giuliano652
Moderatore
Prov.: Brescia
6941 Messaggi |
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pakgio
Nuovo Arrivato
Città: milano/torino
3 Messaggi |
Inserito il - 15 novembre 2007 : 09:43:02
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ciao giuliano, numero impulsi e durata li decido io...
in definitiva come fai a regolare la frequenza? |
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Discussione |
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Strumento di lisi cellulare dal nome incognito
Didattica
