ciao a tutti, ho un problema con il clonaggio del Dna. perchè dopo aver clonato, fatto lo screning della libreria, si effettua il subclonaggio del frammento. in pratica a cosa serve il subclonaggio???? grazieeeeeeee
Clonaggio:hai il DNA grezzo di partenza...lo tagli con enzimi di restrizione creando i frammenti da inserire nel vettore da te scelto..il vettore che ha inserito un frammento lo userai poi per infettare una cellula adatta.ok? Il subclonaggio ha lo stesso procedimento,solo che anziche partire con un DNA grezzo,effettui prima una PCR per amplificare una parte desiderata del DNA.Avrai perciò in partenza un amplificato che (rese le sue estremità compatibili) inserirai nel vettore scelto..poi prosegui come per il clonaggio..