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veronica
Nuovo Arrivato
42 Messaggi |
 Inserito il - 14 giugno 2006 : 17:33:49
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Ma cosa sono queste mini preps????????????
NN LO RIESCO A CAPIREEEEEEEEEEEEEEEEEEEEE!!!!!!!!!!!!!!!!!
AIUTATEMI
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fpotpot
Utente
Città: middleofnowhere
1056 Messaggi |
Inserito il - 14 giugno 2006 : 18:57:08
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e' un procedimento per estrarre DNA dalle cellule...prima le lisi,poi filtri il dNA attraverso colonnine e cosi' ce lo hai bello che purificato....i dettagli su cosa sia ogni singolo reagente lo lascio scrivere a qualche scienziato piu' informato.. |
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Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 14 giugno 2006 : 20:45:19
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mini prep:Espressione inglese usata per indicare una preparazione su scala ridotta di DNA plasmidico o fagico.
Fonte: dizionario Zanichelli (Medicina&Biologia)
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Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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Crick82
Utente Junior
139 Messaggi |
Inserito il - 15 giugno 2006 : 00:01:32
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Per capire cosa sia una miniprep è meglio descrivere le varie fasi di un esperimento di laboratorio.
Es. Si vogliono ottenere grandi quantità di un tipo di plasmide in cui è clonato un gene d'interesse.
1) Dapprima si clona il cDNA di interesse nel tipo di plasmide desiderato ( il plasmide tra l'altro deve avere un gene per la resistenza ad un antibiotico).
2) In seguito si prendono cellule batteriche ad es. di Escherichia coli, le si rende competenti (con CaCl2 o mediante elettroporazione) e le si trasforma con il DNA plasmidico.
3) Si mettono queste cellule batteriche in coltura e successivamente aggiungendo un antibiotico si selezionano quelle che hanno assunto il plasmide (si aggiunge l'antibiotico per il quale le cellule, che hanno assunto il DNA plasmidico, sono resistenti). Si formeranno colonie di cellule, ciascuna delle quali contiene DNA plasmidico, quindi in questo modo è aumentata, rispetto all'inizio, la quantità di DNA pasmidico.
4) A questo punto dalle cellule batteriche che sono cresciute si ricava il DNA plasmidico mediante la tecnica MINIPREP.
Riassumendo: si può definire la miniprep come quella tecnica che viene eseguita per ricavare DNA plasmidico da cellule batteriche precedentemente trasformate.
N.B. Se hai qualche lacuna di base è normale che non hai capito ciò che ho scritto.
Dai un'occhiata a questo link per capire i vari passaggi della MINIPREP:
http://www.molecularlab.it/relazioni/dna_ricombinante/06_estrazione_plasmidica.asp
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Rossypossy
Nuovo Arrivato
Città: Roma
17 Messaggi |
Inserito il - 18 giugno 2006 : 15:54:52
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| Mini-prep...si tratta di estrazione di Dna plasmidico da colonie batteriche.Si va incontro a tutta una serie di processi quali, centrifugazioni, lavaggi precipitazioni con etanolo,cloroformio e altre soluzioni che t permettono alla fine di avere il Dna di interesse purificato, che era stato prima inserito nella cell batterica tramite trasformazione.Praticamente a poco a poco tu degradi tutte le componenti del batterio(parete, proteine, e anche RNA) in modo da averne soltanto il Dna plasmidico preedentemente inserito pronto e purificato per doverlo eventualmente sequenziare. |
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mini preps???
Didattica
