quantitative RT-PCR

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Discussione

neurodue
Nuovo Arrivato

5 Messaggi

Inserito il - 04 febbraio 2010 : 20:10:47

ciao a tutti!

mi sono appena iscritta!! e ho bisogno di voi!

spero di ricevere un aiuto!

avrei una domanda da porvi... riguardo quantitative real time RT-PCR...

ho piccole quantit� di RNA (ordine di ng) che non posso quantificare in quanto la concentrazione � bassa e devo fare una RT. non sapendo da quanto RNA parto per ogni campione e considerato che posso avere quantit� diverse di RNA per ciascuno di loro, posso dire di avere una stessa efficienza di retrotrascrizione... partendo da piccole quantit� di RNA... ?? e poi fare la real time e normalizzare per uno/due house keeping senza pormi il problema di avere cDNA diverso per ogni campione... e quindi comparare i diversi campioni tra loro? in teoria con poco RNA, l'RT dovrebbe funzionarmi bene... mi aspetterei il contrario con tanto RNA... (???)...

con il kit che uso so che sono nel range di quantit� di RNA per avere una buona efficienza di retrotrascrizione... anche per piccoli geni o rna...

grazie!!

domi84
Moderatore

Citt�: Glasgow

1724 Messaggi

Inserito il - 05 febbraio 2010 : 00:08:08

Ciao Neurodue e benvenuta sul forum!!!

Ti invito a leggere il regolamento se non l'hai ancora fatto
http://www.molecularlab.it/forum/faq.asp
In particolare:

Citazione:

9) Non duplicare i messaggi, n� all'interno dello stesso forum, n� scrivendo lo stesso messaggio su pi� forum (cross-posting), perch� ci� rende molto difficile seguire una conversazione se piu persone rispondono allo stesso messaggio in diversi forum.
Se si � indecisi in quale sezione scrivere la propria domanda sceglierne una che sembri appropriata, i moderatori provvederanno a spostarla in caso lo ritengano necessario.
Tutti i messaggi doppi verranno cancellati.

Si continua qui:
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=16586

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
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