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mairam3003
Nuovo Arrivato



3 Messaggi
Inserito il - 06 febbraio 2010 : 16:08:25  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di mairam3003 Invia a mairam3003 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao a tutti, scusate ma non riesco proprio a capire una cosa, come si fa a capire l'orientamento quando clono il mio DNA? grazie

Patrizio
Moderatore

mago

Città: Barcellona


1914 Messaggi
Inserito il - 06 febbraio 2010 : 18:47:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Patrizio  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Patrizio Invia a Patrizio un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
una pcr ?

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mairam3003
Nuovo Arrivato



3 Messaggi
Inserito il - 06 febbraio 2010 : 18:55:08  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di mairam3003 Invia a mairam3003 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
no, quando inserisco il mio frammento all'interno di un vettore (ad esempio un plasmide) per poter ottenere il prodotto desiderato devo sapere l'orientamento (foward o reverse), so che bisogna sottoporre a una digestione con gli enzimi di restrizione e poi?
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Patrizio
Moderatore

mago

Città: Barcellona


1914 Messaggi
Inserito il - 06 febbraio 2010 : 20:46:21  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Patrizio  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Patrizio Invia a Patrizio un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
e poi carichi sul gel e vedi le bande, ma anche con la pcr puoi farlo se hai i primers giusti

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GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi
Inserito il - 06 febbraio 2010 : 21:02:57  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ma cosa intendi esattamente?
Se intendi quando devi inserire l'inserto nel vettore la strategia migliore è quella di tagliare le 2 estremità con enzimi di restrizione diversi, in modo che il frammento si possa inserire solo in un senso.
Se invece lo hai inserito con un clonaggio blunt oppure con gli stessi enzimi di restrizione da entrambi i lati allora può essere che si sia inserito in entrambi i versi e per controllare in che verso è fai come ti ha detto Patrizio.
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mairam3003
Nuovo Arrivato



3 Messaggi
Inserito il - 06 febbraio 2010 : 22:15:11  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di mairam3003 Invia a mairam3003 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ho capito, grazie mille!
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