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Flap
Utente Junior

172 Messaggi

Inserito il - 16 febbraio 2010 : 20:48:24

Ciao ragazzi,
qulacuno ha mai transfettato cellule di mammifero (in questo caso BHK21) con elettroporazione? Nel laboratorio dove sto facendo il tirocinio seguono un protocollo che mi suscita qualche perplessit�. Premetto che fino ad adesso ho avuto a che fare solo con elettroporazione di batteri..le due sono piuttosto simili in realt� ma ci sono alcuni accorgimenti importanti che nel caso di quelle animali non vengono seguite. Per esempio io ho sempre utilizzato punte e cuvette ghiacciate che venivano dal frigo di -20 per elettroporare i batteri, invece per quelle di mammifero pare che non ci sia nessuna necessit� di fare questo. Magari potrebbe essere perch� i batteri vengono da -80 quando le si elettropora e forse si tenta di evitare uno stress termico usando punte e cuvette fredde. Oppure qualcuno utilizza punte e cuvette fredde anche per quelle di mammifero? Un altra domanda �..� vero che a volte la selezione di cellule di mammifero � piu complicata di quella per i batteri?Nel senso che richiede piu tempo e a volte non riesce bene? Per quanto tempo il plasmide si mantine dopo l'elettroporazione?Grazie..