ciao a tutti ho appena seguito un laboratorio d fisio il cui scopo era verificare ke il rilascio d neurotrasmettitori fosse dovuto alla depolarizzazione della membrana; bisognava anke verificare la calcio dipendenza dell'esocitosi delle vescicole sinaptiche. x fare qst abbiamo usato sinaptosomi del cervello d ratto e scelto d misurare la quantità d glutammato e gaba rilasciati in condizioni basali (mantenendo i sinaptosomi in incubazione in mezzo fisiologico normale, a 37 gradi) in condizioni d depolarizzazione (il mezzo in qst caso è ad elevata concentrazione d potassio) e in condizioni d depolarizzazione in assenza d calcio (mezzo con alto potassio e senza calcio) alla fine dell'esperimento siamo riusciti a dimostrare ke la depolarizzazione causa il rilascio d neurotr. ma non la calcio dipendenza, ora dovremmo preparare una relazione facendo considerazioni e critiche sul modo in cui è stato condotto l'esperimento, x esempio -sul tipo d modello -sulla possibilità d condurre il modello in altre condizioni x dimostrare qst stesse o altre caratteristiche del funzionamento delle sinapsi -strategie alternative x migliorare l'esperimento qualcuno ha qualke idea? grazie!!!
Per dimostrare la calcio-dipendenza secondo me potresti mantenere le condizioni di depolarizzazione e alte concentrazioni di potassio e aggiungere una conotossina (un veleno che blocca i canali Ca)oppure trovare un modo per bloccare l'effetto della protein kinasi Ca/calmodulina dipendente.