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lorettabolgan
Nuovo Arrivato
Prov.: venezia
Città: dolo
6 Messaggi |
 Inserito il - 25 febbraio 2010 : 16:54:05
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Integro il messaggio precedente con altri dettagli:
il sangue che uso è prelevato fresco con anticoagulante citrato di sodio.
Lo diluisco 1:1 con una soluzione fisiologica di EDTA e lo stratifico su Ficoll-paque-Plus in rapporto 1:1; centrifugo a 400 g per 30 min.
La soluzione di EDTA e il ficoll sono a t°C ambiente (tra i 20-25°C).
Ho provato a centrifugare a 1000g per 30' e l'anello si separa molto bene, ma non so se in questo modo viene compromessa la vitalità dei linfociti.
Il problema è che l'anello risulta molto inquinato di globuli rossi, che mi impediscono il recupero dei linfociti.
Vorrei sapere inoltre se possono essere usati anche altri coagulanti come EDTA o eparina, o se interferiscono con la separazione.
Ringrazio tutti fin d'ora per l'aiuto!!
Loretta
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Separazione linfociti con ficoll
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