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Vale_80
Nuovo Arrivato

7 Messaggi

Inserito il - 03 marzo 2010 : 12:25:08

Ciao a tutti,
mi sono appena iscritta e devo dire che gi� in passato ho trovato buoni hints su questo forum.
Volevo sapere se qualcuno di voi conosce un metodo per inserire una delezione (in omozigosi) su un plasmide.

Generalmente se devo fare mutagenesi di una singola base uso il quick change con ottimi risultati. Per� il kit non � utilizzabile per creare una delezione di 14 bp ben precisa.
Potrei clonare direttamente l'inserto deleto ma attualmente sto avendo problemi ed � un altra discusione al massimo.
Grazie mille a chi sapr� rispondermi,
Vale

Vale_80
Nuovo Arrivato

7 Messaggi

Inserito il - 04 marzo 2010 : 10:21:01

Ho riletto il protocollo del quickchange kit, sembra che sia in grado di creare anche delezioni (e inserzioni) mirate di due e pi� nucleotidi.

Quindi far� questa prova visto che ho il kit disponibile, giusto aspettare l'arrivo dei primers di mutagenesi...speriamo!
Far� sapere il risultato
Ciao ciao
Vale