Citazione:

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Allora ad esempio ho capito che se sto preparando un terrendo di coltura (nella fattispecie era un YPD per lievito) che deve essere 200mL e devo prelevare glucosio da uno stock 10X (10 volte più concentrato), devo diluirlo 10 volte (fattore di diluizione 1:10) quindi farò 200mL/10= 20gr di glucosio che mi servono e il resto arrivo a volume con acqua.

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Citazione:

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una volta estratto il DNA che era 2 microlitri sono stati aggiunti 8 microlitri di acqua, poi dovevo aggiungere un buffer da stock 6X. In questo caso dovevo fare 10microlitri di campione/5= 2 microlitri di buffer da aggiungere, quindi ne devo prelevare 1/5 (questo è perchè prendo 1 parte di buffer e 5 parti che è il mio campione)

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Citazione:

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ho già letto l'articolo diluizioni dal sito

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Citazione:

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Messaggio inserito da chick80

Beh, non ti torna perchè devi pensare al volume finale non a quello iniziale!

Allora, hai 2 possibilità:

Citazione:

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1) conosci il volume finale (cioè campione + buffer), ad es. 6 ul.
Fai 6/6 = 1 quindi 1ul di buffer + 5ul di campione

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Ok e quindi se avevo un buffer 8x e il mio volume finale era sempre 12 microlitri prendevo 1,5 microlitri di buffer e 10,5 microlitri di campione giusto?
[quote]
2) non sai il volume finale, vuoi usare tutto il tuo campione (il tuo caso)
Sai che:
Vcampione = 5 * Vbuffer in quanto Vtotale = 5 * Vcampione + Vbuffer

Quindi Vbuffer = Vcampione / 5 = 10ul / 5 = 2ul

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Citazione:

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Mmm forse ho capito che intendi, dato che ho un buffer 6x tu mi dici che appunto prendo una parte di buffer e cinque parti di campione (cioè tutto), quindi il volume del campione è 5 volte il volume del buffer e da lì me lo trovo, quindi se avessi avuto un buffer 8x (e avrei preso 1 parte di buffer e 7 di campione cioè tutto, il mio volume del campione sarebbe stato uguale a 7 volte quello del buffer)???

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