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marsi.mq
Nuovo Arrivato
2 Messaggi |
 Inserito il - 29 marzo 2010 : 13:09:55
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Ciao a tutti,
vorrei un info riguardo la rilevazione con l'anticorpo nella membrana dopo la western.
Per essere più chiara mi interessa sapere se posso rilevare contemporaneamente la mia proteina di interesse insieme alla beta actina o devo procedere uno alla volta?
L'ab 2 della mia proteina e anti rabbit invece della b actina è anti mouse.
Grazie mille
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cami
Utente Junior
Città: roma
136 Messaggi |
Inserito il - 29 marzo 2010 : 15:13:46
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io non l'ho mai fatto, e certo non si sa mai, però dubito fortemente che si possa fare... tu vorresti incubare insieme i due primari e poi i due secondari?
in genere quando voglio vedere 2 proteine sullo stesso filtro, per abbreviare i tempi ed evitare di incubare troppe volte lo stesso filtro con anticorpi diversi, io lo taglio, sinceramente è quello che consiglierei anche a te...  |
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CancerResTOU
Nuovo Arrivato
7 Messaggi |
Inserito il - 29 marzo 2010 : 15:25:47
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| i due primari insieme no, ma puoi tagliare il filtro. tutto dipende dal peso della tua proteina. considerando che la beta actina pesa 42 kDa, se hai una proteina che sta troppo vicina il taglio risulta difficile, è un rischio. a meno che non utilizzi un altro normalizzatore, sempre che non sia regolato in qualche modo dalla proteina che stai controllando. |
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Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 29 marzo 2010 : 17:22:48
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Due anticorpi contemporaneamente nella stessa
soluzione competono per l'interazione con la membrana,
quindi non è garantito nulla: io non proverei neanche.
Piuttosto taglia la membrana in due pezzi. |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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western
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