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 Problemi con differenziazione SH-SY5Y
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violsk
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Inserito il - 02 maggio 2010 : 18:13:56  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di violsk Invia a violsk un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti,
ho avuto dei problemi con la differenziazione delle cellule SH-SY%Y in acido retinoico.
Mi sono attenuta ad un lavoro in letteratura in cui hanno piastrato una multiwell da 96 pozzetti con 5000 cellule per pozzetto, nel loro medium a cui viene aggiunto acido retinoico 5 micromolare, mantenendola 5 giorni in incubazione.
Al terzo giorno, accingendomi a cambiare il medium, noto che le cellule non hanno attecchito!!!
sono pochissime, e più che altro concentrate nel perimetro del pozzetto.
Potrebbe essere un problema di numero esiguo di cellule?
dovrei forse aumentarlo a 8000 cellule per pozzetto?
Vi ringrazio se potete suggerirmi qualche altra ipotesi riguardo al possibile errore che posso aver compiuto, sono staata molto scrupolosa
e non riesco proprio a capire cosa sia accaduto!
grazie mille,
Violetta
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