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Discussione

Leilaa
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 06 maggio 2010 : 18:46:15

ciao a tutti! Premettendo che non ho trovato risposta ai miei quesiti sul forum... avrei qualche domanda a proposito dell Real Time PCR:

devo svolgere un lavoro di diploma sull'influenza suina H1N1 e devo parlare di come viene quantificato questo virus.
Ho trovato una procedura della Roche, che usa la tecnica della Real Time PCR.

La PCR amplifica frammenti di DNA, quindi come � possibile che nella Real Time si usi il materiale genetico del virus in questione, ma invece di DNA si usi RNA?

Nella Real time si usa RNA?

� questo che non capisco, come si possano amplificare frammenti di RNA, forse usando una RNA polimerasi?

Allego la procedura della Roche, che non riesco a capire

Vi ringrazio fin da ora se riuscirete ad aiutarmi!

Allegato:

Roche protocol h1n1.pdf
1373,06 KB

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 06 maggio 2010 : 18:54:53

Semplicemente perch� � una RT-PCR, RT = retrotranscription.
Ovvero prima si effettua un ciclo di retrotrascrizione in cui l'RNA viene convertito a cDNA dopo di che si effettua la PCR quantitativa (real-time).
Se leggi bene il protocollo che hai allegato parla chiaramente di retrotrascrizione.

Leilaa
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 06 maggio 2010 : 18:57:30

il fatto � che non capisco bene l'inglese... in svizzera non lo impariamo

Comunque grazie, prover� a rileggere il protocollo pi� attentamente!