Westernblot: elettroforesi PAGE o SDS-PAGE?

Forum

Registrati Discussioni Recenti Preferiti Utenti Cerca Regolamento RSS Statistiche

Utilità

I libri
consigliati:

Biochimica (3 vol.)
Thomas M. Devlin

Il gene VI
Benjamin Lewin

Anatomia del Gray
Autori Vari

Altri Libri

Nome Utente:	Password:
Riconoscimi automaticamente

Tutti i Forum

MolecularLab

Tecniche

Westernblot: elettroforesi PAGE o SDS-PAGE?

Nuova Discussione

Nuovo Sondaggio

Rispondi

Aggiungi ai Preferiti

Cerca nelle discussioni

Risorse di Tecniche di Laboratorio:

Didattica e Relazioni

InsideBlog

Siti Scientifici

Protocolli Laboratorio

Siti Scientifici

Ultime notizie

Aggiungi i tag

Quanto � utile/interessante questa discussione:

Autore

Discussione

Smichel
Nuovo Arrivato

36 Messaggi

Inserito il - 09 maggio 2010 : 16:41:33

Salve,
ho un dubbio sulla tecnica del western blot.
Se lo scopo del Western blot � identificare la mia proteina di interesse tramite un anticorpo, come fa l'anticorpo a legarsi alla proteina se questa � stata denaturata dall'ellettroforesi SDS-PAGE?
Non bisognerebbe fare una elettroforesi NON denaturante per conservare la struttura della proteina e quindi gli eventuali epitopi riconusciuti dall'anticorpo e formati dal ripiegamento della catena di amminoacidi?

Grazie.

SpemannOrganizer
Utente

Citt�: Los Angeles

955 Messaggi

Inserito il - 09 maggio 2010 : 17:03:53

In genere la porzione riconosciuta dall'anticorpo � relativamente piccola e costituita da amminoacidi contigui e quindi la denaturazione non influisce pi� di tanto. A volte per� l'anticorpo riconosce un particolare folding della proteina, magari costituito da porzioni e quindi amminoacidi relativamente distanti nella sequenza primaria, ma che si trovano vicini dopo il ripiegamento. In questi casi si fa una elettroforesi in condizioni non denaturanti come tu stesso suggerivi

Smichel
Nuovo Arrivato

36 Messaggi

Inserito il - 09 maggio 2010 : 17:13:26

ah ok allora � indifferente fare una o l'altra, ma si fa di solito quella denaturante per dividere meglio le proteine per il proprio peso molecolare, giusto?