Salve,ho un esame a breve qualcuno potrebbe spiegarmi il perchè di qst risultato? Premetto che l'esperimento lo so, ma nn capisco la dinamica in questo caso!!
Ripetiamo, con un batterio diverso da E.Coli, l'esperimento di Meselson e Sthal. Troviamo che 120 minuti dopo il trasferimento in terreno contenente azoto leggero il DNA si ripartisce, in gradiente di CsCl, in 2 bande di intensità equivalente.Indica il tempo di duplicazione: a)circa 10 minuti b)circa 20 min c)circa 60 min (corretta) d)circa 120 min e)circa 240 min
Il concetto dell'esperimento è che quando metti l'azoto leggero nel terreno ogni cellula che si duplica darà origine a due cellule con DNA per metà pesante e per metà leggero (un filamento con azoto pesante e un filamento con azoto leggero). La seconda volta che si duplicano però otterrai metà cellule con DNA leggero (entrambi i filamenti) e metà con DNA come le originali (un filamento leggero e uno pesante).Prova a immaginarti il DNA con un filamento leggero e uno pesante; quando la cellula lo duplica i due filamenti si dividono e su entrambi gli stampi viene costruito il complementare usando ovviamente solo l'azoto leggero che trovano nel terreno. Metà delle molecole di DNA saranno quindi completamente costituite da azoto leggero e queste daranno una banda nel gradiente; l'altra metà avrà un filamento leggero e uno pesante e quindi saranno molecole più pesanti rispetto alle precedenti, dando la seconda banda di uguale intensità. In sostanza le cellule in 120 min si saranno duplicate due volte. Se si fossero duplicate di più il rapporto tra le due molecole di DNA di peso differente sarebbe stato diverso (cioè a favore delle molecole leggere). Se si fossero duplicate una sola volta avresti tutte molecole di DNA dello stesso peso (perchè costituite tutte da un filamento pesante e uno leggero..vedi spiegazione all'inizio). Il tempo di una duplicazione è quindi di 60 min. Spero di essere riuscita a spiegarmi..
ma in teoria non si dovrebbero vedere tre bande? nel senso due sovrapposte (una ottenuta della prima generazione e l'altra dalla seconda) perchè mediamente pesanti(filamento legg+pesante) e poi un'altra banda più in alto perchè è la metà di DNA leggeri...
La prima generazione non la vedi..tutte le cellule dela prima generazione si dividono a formare la seconda generazione. Non devi sommare prima e seconda generazione ma considerare solo la seconda
Allora l'intensità della banda non c'entra con la densità. Il gradiente di CsCl serve proprio per separare molecole con densità diversa, nel nostro caso le molecole di DNA con diverso peso ed è per questo che risultano due bande. L'intensità di una banda invece dipende dalla quantità di molecole presenti..maggiore è il numero delle molecole presenti più la banda risulterà intensa. Ora io non ho mai fatto un gradiente d questo tipo però d solito una banda più intensa risulta visivamente più scura dell'altra. Ti consiglio l'animazione presente in questo sito: http://50annidna.scienze.unipd.it/DFTB/20/concept/index.html è molto carina e ti può chiarire le idee; oppure trovi spiegato bene anche nel Watson "biologia molecolare del gene" se ce l'hai. In ogni caso se hai altri dubbi mi fa piacere rispondere finchè riesco..