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superilala
Nuovo Arrivato

Citt�: Rotterdam

30 Messaggi

Inserito il - 30 giugno 2010 : 13:48:27

Mi chiedevo..secondo voi e' possibile preparare il terreno per le cellule addizionato di G418 (gentamicina) e conservarlo a 4C?..in lab mi hanno detto di prepararlo fresco ogni volta (sto selezionando mille cloni ed e' una bella scocciatura!) pero' mi sembra strano che sia cosi instabile..voi come vi regolate?

SpemannOrganizer
Utente

Citt�: Los Angeles

955 Messaggi

Inserito il - 30 giugno 2010 : 14:30:47

non conosco l'emivita della gentamicina, per� l'emivita degli antibiotici in generale decresce sensibilmente con l'aumentare della temperatura. D'alro canto, noi usiamo soluzioni gentamicna/mmr (per Xenopus laevis) che una volta preparate vengono tenute a 16 �C (comunque non per molto, pochi giorni).

RM
Nuovo Arrivato

115 Messaggi

Inserito il - 30 giugno 2010 : 14:33:00

Io preparo lo stock sciogliendolo in PBS, lo aliquoto e lo tengo a -20�C. Al bisogno, scongelo una o pi� aliquote e lo aggiungo al terreno, che cambio ogni 3-4 giorni.

Dionysos
Moderatore

Citt�: Heidelberg

1913 Messaggi

Inserito il - 01 luglio 2010 : 00:52:16

Il G418 non � gentamicina, ma genetecina.

http://en.wikipedia.org/wiki/G418

Io per i cloni ne preparavo ogni volta una bottiglia 500 ml
e conservavo a 4�C, e non ho avuto problemi di selezione.

Volere libera : questa � la vera dottrina della volont� e della libert�
(F.W. Nietzsche)

Less Jim Morrison, more Sean Morrison!

paolo865
Utente Junior

Prov.: Como
Citt�: Olgiate Comasco

262 Messaggi

Inserito il - 01 luglio 2010 : 07:44:13

Io di solito preparo delle aliquote da 50 mL con G418 ogni qual volta lavoro sotto cappa e se me ne resta un po' lo conservo a 4� e lo uso la volta precedente...non ho mai avuto problemi..per� considera che lo uso al massimo nel giro di 3-4 giorni.