analisi quanto-qualitativa degli AA

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badmanf85
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12 Messaggi

Inserito il - 09 luglio 2010 : 17:07:16

ragazzi devo chiedervi una cosa:
parlando dell'analisi quanto-qualitativa degli aa presenti in una proteina
allora una volta fatta l'idrolisi acida di una proteina e i singoli aa separati tramite cromatografia a scambio Cationico in ambiente acido, tramite i tempi di eluizione riesco ad individuare l'aa (analisi qualitativa) tramite gli standard, una volta eluiti faccio reagire i miei aa con ninidrina per avere un assorbimento a 570 nm in uno spettrofotometro che servir� tramite la legge di lambert e beer a conoscere la [] e quindi l'analisi quantitativa.
La domanda �: la reazione dell'amminoacido con la ninidrina forma un composto imminico nel quale l'unica parte dell'amminoacido rimasta � l'azoto,(il resto � andato via come aldeide e CO2) di questo composto ne faccio l'analisi quantitativa a 570 nm. Ma se io ho solo l'azoto come faccio a dire che la [] x corrisponde ad un determinato aa???!!!

� solo per capire, in quanto io ho pensato che quando si eluisce la colonna si prendono diverse aliquote, contenenti ognuna un singolo tipo di aa(avendo cos� per ogni aliquota un aa diverso), ogni boccetta si fa reagire con la ninidrina e si fa l'analisi allo spettrofotometro.
� cos�? o si fa in un altro modoooooo????????????

Grazie