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Lisa_86
Nuovo Arrivato
Prov.: RM
Città: Roma
19 Messaggi |
 Inserito il - 07 agosto 2010 : 18:37:54
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se sia vettore che inserto hanno estremità piatte, l'inserto potrà inserirsi nelle due orientazioni e quindi bisognerà fare uno screening di funzione!
con le estremità coesive questo nn avviene perchèin genere tagli con 2 enzimi diversi e quindi l'inserimento può avvenire solo nel modo che hai deciso.
se però il vettore ha estremità piatte e l'inserto le ha coesive, puoi usare la klenow. è un enzima he ha attività polimerasica 5’ -> 3’ e esonucleasica 3' -> 5'. in questo modo ricrei estremità piatte anche sull'inserto.
poi, come detto sopra, dovrai screenare l'inserimento degli inserti!!!!! |
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