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erdogan
Nuovo Arrivato
30 Messaggi |
 Inserito il - 16 settembre 2010 : 01:08:19
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salve a tutti utenti del forum:::ho un dubbio persistente e indeciso nella seconda parte del test.dunque il test di ames è importante per osservare la retromutazione del batterio salmonella
noi sappiamo che il batterio salmonella.T è ceppo che esiste in forma autrofa,cioè è in grado di proliferare in un terreno minimo senza l'istidina.quindi nel test di ames osserviamo in primis una mutazione del batterio salmonella da auxotrofo a prototrofo,quindi incapace di sintetizzare il componente istidinA.che cosa accade???batterio incapace-deficiente nel sintetizzare istidina viene immesso in una beuta contenente terreno di coltura minimo e materiale,sostanza cancerogena diretta.osserviamo che il batterio salmonella+la sostanza cancerogena presa in esame è in grado di alterare la struttura batterica del batterio revertendolo in batterio auxotrofo...quindi vuol dire che ci sono state credo inserzioni,delezioni a livello del materiaLE GENICO.ALLA FINE INSERIAMO I BATTERI RETROMUTATI IN TERRENO MINIMO E OSSERVIAMO LA CRESCITA:::OK__MA il problema è la seconda parte<:::come funziona il testdi ames applicato alle cellule epatiche estratto s9 ?????????????????gentilmente ringrazio
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 16 settembre 2010 : 14:10:16
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 c'è molta confusione in quello che scrivi!
Innanzitutto c'è un grossissimo errore, hai confuso auxotrofo e prototrofo!
prototrofo: è in grado di crescere in un terreno minimo
auxotrofo: non è in grado di sintetizzare un componente necessario per la sua crescita e quindi può crescere solo se gli viene fornito dall'esterno.
Inoltre non puoi iniziare dicendo che:
Citazione:
Messaggio inserito da erdogan
... il test di ames è importante per osservare la retromutazione del batterio salmonella
quello è il principio su cui si basa, ma non è importante per quello, è importante perché ti permette di testare la mutagenicità delle sostanze!
Comunque provo a correggere quello che hai scritto tu:
Citazione:
noi sappiamo che il batterio salmonella.T è ceppo che esiste in forma autrofa prototrofa, cioè è in grado di proliferare in un terreno minimo senza l'istidina.
poi puoi avere vari ceppi auxotrofi che non sono in grado di sintetizzare istidina, puoi avere diversi ceppi con diverse mutazioni ma tutti alla fine non sono in grado di sintetizzare istidina.
Citazione:
quindi nel test di ames osserviamo in primis una mutazione del batterio salmonella da auxotrofo a prototrofo da prototrofo a auxotrofo, quindi incapace di sintetizzare il componente l'amminoacido istidinA
in realtà non è che osservi una mutazione ma tu parti già a fare il test utilizzando dei mutanti auxotrofi!
Citazione:
batterio incapace-deficiente nel sintetizzare istidina viene immesso in una beuta contenente terreno di coltura minimo + istidina e materiale,sostanza cancerogena diretta.
è fondamentale mettere l'istidina, altrimenti morirebbero tutti subito e non potresti testare la sostanza.
Citazione:
osserviamo che il batterio salmonella+la sostanza cancerogena presa in esame è in grado di alterare la struttura batterica del batterio revertendolo in batterio autrofo prototrofo
sì, però per osservare questo devi prima piastrare i batteri in assenza di istidina, solo quelli che saranno revertiti saranno in grado di sopravvivere.
Citazione:
ALLA FINE INSERIAMO I BATTERI RETROMUTATI IN TERRENO MINIMO E OSSERVIAMO LA CRESCITA:
ok!
la seconda parte che dici tu sarebbe il test di Ames "modificato", in cui al terreno di coltura aggiungi anche l'estratto S9 di fegato di ratto, per fornire gli enzimi epatici che possono metabolizzare la sostanza che devi testare. Questo si fa perché la sostanza potrebbe non agire come mutageno in quanto tale, ma potrebbe agire una volta metabolizzata.
Comunque in questo post: http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=15723
chick80 ha indicato un ottimo link! |
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erdogan
Nuovo Arrivato
30 Messaggi |
Inserito il - 19 settembre 2010 : 01:03:05
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| ok,adesso mi è chiaro il concetto!!!gentilmente ringrazio!!! |
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