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lora
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 Inserito il - 28 settembre 2010 : 16:35:28
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Salve, avrei bisogno di un chiarimento riguardo alla tecnica di Reverse. Devo fare la Real Time su dei campioni di RNA estratti da cellule. Ho fatto, dopo la lettura allo spettrofotometro e i relativi conti, la reverse sui campioni. Di ognuno ho fatto anche il controllo negativo cioè ho messo l'RNA ma non la Reverse Transcrittasi (per vedere che non ci sia contaminazione da RNA o DNA). Preparando la mix per i campioni negativi, ho messo meno microlitri di Rnasi rispetto a quelli calcolati nella ricetta, in quanto non ne avevo più....(finito il kit....). Questo può implicare qualcosa ai fini della PCR qualitativa e poi quantitativa? Posso andare avanti con il mio esperimento o sarebbe meglio fare di nuovo la Reverse? (PS: l'RNA delle cellule è finito...).Grazie.
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