Salve a tutti! Sn un laureando in medicina completo profano del laboratorio...ho bisogo di sapere come attivare in vitro i linfociti prelevati da sangue periferico,e fargli produrre TNF. Ke qlkuno giunga in mio aiuto!! Grazie in anticipo...
immagino che tu utilizzi dei Th. secondo me puoi attivarli mettendoli a contatto con un epitopo riconosciuto dal loro TCR (ovviamente significa che dovrai tipizzare il sangue del tuo paziente) oppure potresti anche attivarli con stimoli che genericamente inducono la produzione del TNF, magari cn LPS.
io lavoravo con dei Tcitotossici e li attivavo mettendoli a contatto con dei blasti o con i peptidi che riconoscevano, poi facevo un elispot per valutare la quantità di IFNgamma prodotto.
Chi usa invece PMA e Ionomycin per attivare i linfociti per la produzione di altre interleuchine mi potrebbe dire in che cocentrazioni le utilizza? Giusto per fare due confronti.. grazie!!