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Valette
Nuovo Arrivato

39 Messaggi

Inserito il - 11 dicembre 2010 : 17:00:32

Ciao a tutti, leggendo un protocollo per la quantificazione dell'alpha-KG in cellule, arrivo al punto in cui abbiamo un pellet di cellule che viene deproteinizzato, econ acido perclorico e poi neutralizzato, al ch� ci aggiungiamo glutammato DH, NADH e NH4Cl, a questo punto dice: l'alpha-KG viene quantificato in base al NADH ossidato a una certa lunghezza d'onda mediante lo spettrofotometro...ecco non mi � chiara questa parte...il NADH ossidato si intende dall'ossidazione da parte di cosa?

Patrizio
Moderatore

Citt�: Barcellona

1914 Messaggi

Inserito il - 11 dicembre 2010 : 23:50:35

L-glutammato + H2O + NAD+ #8644; alpha-KG + NH3 + NADH + H+

Immagino che nel protocollo si avr� l'ossidazione del NADH/H presente in cellula , al che avendo un eccesso di NH3 e quantit� nota di NADH/H il limitante sar� l'alpha-KG

Valette
Nuovo Arrivato

39 Messaggi

Inserito il - 18 gennaio 2011 : 17:53:13

Scusa il ritardo, ho letto oggi la tua risposta.Grazie mille per la disponibilit�...

Quindi se ho capito bene, l'eccesso di NH4CL e NADH fa spostare il verso della reazione e in questo modo l'alpha-KG si converte in glutammato ossidando il NADH?